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          "pt" => "<p id="spar0010" class="elsevierStyleSimplePara elsevierViewall">Paciente do sexo masculino&#44; 35 anos&#44; com les&#227;o cerat&#243;tica na coxa esquerda&#46; A observa&#231;&#227;o cl&#237;nica incluiu dermatofibroma e acantoma no diagn&#243;stico diferencial&#46; &#40;A&#8208;D&#41;&#44; histologicamente&#44; observa&#8208;se epiderme hiperparacerat&#243;tica sobrejacente a uma prolifera&#231;&#227;o d&#233;rmica mal delimitada&#44; composta por c&#233;lulas fusiformes intersticiais mitoticamente inativas&#46; Algumas &#225;reas do tumor &#40;por&#231;&#227;o superior&#41; eram densamente celulares&#44; enquanto outras &#40;por&#231;&#245;es m&#233;dia e inferior&#41; eram escler&#243;ticas e hipocelulares&#46; A epiderme sobrejacente se apresenta atenuada sobre o tumor quando comparada &#224; epiderme peritumoral hiperpl&#225;sica&#46; Dentro do tumor&#44; observa&#8208;se aprisionamento de col&#225;geno&#44; vasos de paredes finas e hemorragia&#46; &#40;E&#8208;H&#41;&#44; epiderme peritumoral que mostra v&#225;rias c&#233;lulas de Langerhans positivas para S100 localizadas principalmente na camada espinhosa&#46; As c&#233;lulas de Langerhans est&#227;o quase ausentes na epiderme que cobre o tumor&#46; Amplia&#231;&#245;es&#58; A e E&#44; 20&#215;&#59; B e F&#44; 40&#215;&#59; C e G&#44; 100 &#215;&#59; D e H&#44; 400&#215;&#46;</p>"
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ap&#243;s a ativa&#231;&#227;o&#44; migram da epiderme para os linfonodos&#46; As CL podem capturar ant&#237;genos&#44; ativar c&#233;lulas T indiferenciadas &#40;<span class="elsevierStyleItalic">naive</span>&#41; e desencadear uma resposta imune espec&#237;fica de c&#233;lulas T com sua expans&#227;o e diferencia&#231;&#227;o clonal em c&#233;lulas T efetoras e de mem&#243;ria&#46;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0060"><span class="elsevierStyleSup">2</span></a> Altera&#231;&#245;es na distribui&#231;&#227;o das CL ocorrem na epiderme peritumoral e na epiderme que cobre os tumores d&#233;rmicos&#46;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0065"><span class="elsevierStyleSup">3</span></a> Dermatofibroma &#233; um tumor dermatol&#243;gico comum que geralmente afeta os membros inferiores de mulheres&#46; Alguns autores consideram o dermatofibroma um processo reativo&#44; mas outros o consideram tumor benigno de fibroblastos&#44; miofibroblastos ou mesmo dendr&#243;citos d&#233;rmicos&#46;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0070"><span class="elsevierStyleSup">4</span></a> O presente estudo compara a densidade de CL positivas para S100 na epiderme peritumoral e na epiderme que recobre as c&#233;lulas neopl&#225;sicas no dermatofibroma&#46;</p><p id="par0015" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Este estudo retrospectivo incluiu amostras de pele fixadas em formalina e emblocadas em parafina de 20 casos de dermatofibroma&#46; A idade m&#233;dia dos pacientes foi de 49&#44;40 &#177; 3&#44;34 anos&#46; As amostras foram coletadas de pacientes sem hist&#243;rico de altera&#231;&#245;es imunol&#243;gicas&#46; O grupo controle &#40;pele normal e saud&#225;vel&#41; incluiu 10 indiv&#237;duos saud&#225;veis&#44; pareados por sexo e idade&#44; submetidos a bi&#243;psias de pele por les&#245;es benignas&#44; bem como a pele peritumoral saud&#225;vel &#40;pele saud&#225;vel adjacente aos tumores&#41;&#46; Os tecidos fixados em formalina e emblocados em parafina foram submetidos a an&#225;lise imuno&#8208;histol&#243;gica para CL com anticorpos contra o ant&#237;geno S100&#44; usou&#8208;se o m&#233;todo da peroxidase&#47;diaminobenzidina&#44; similarmente a estudo anterior&#46;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0075"><span class="elsevierStyleSup">5</span></a> Os controles externos inclu&#237;ram melanoma &#40;para S100&#41;&#46; Os controles negativos inclu&#237;ram cortes histol&#243;gicos que n&#227;o foram incubados com os anticorpos prim&#225;rios &#40;substitu&#237;dos por PBS&#41;&#46;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0075"><span class="elsevierStyleSup">5</span></a> Os controles positivos e negativos produziram resultados positivos e negativos&#44; respectivamente&#44; indicaram a validade dos resultados&#46;</p><p id="par0020" class="elsevierStylePara elsevierViewall">As c&#233;lulas imunorreativas com S100 foram contadas com microsc&#243;pio &#243;ptico Olympus&#44; como relatado por outros grupos&#46;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0080"><span class="elsevierStyleSup">6</span></a> As imagens foram feitas com c&#226;mera digital DFC450&#46; A epiderme foi examinada sob pequeno aumento e os <span class="elsevierStyleItalic">hot spots</span> foram identificados&#46; As CL positivas para S100 em cada 1&#46;000 c&#233;lulas epid&#233;rmicas foram contadas com aumento de &#215;400&#46; As CL imunorreativas com imunocolora&#231;&#227;o marrom ou vermelha e um n&#250;cleo vis&#237;vel foram consideradas positivas&#44; bem como os dendritos&#46; Os resultados foram relatados como m&#233;dia e erro padr&#227;o das m&#233;dias&#46; Foi usado o teste <span class="elsevierStyleItalic">t</span> de Student&#44; com p&#160;&#60; 0&#44;05 considerado estatisticamente significativo&#46;</p><p id="par0025" class="elsevierStylePara elsevierViewall">CL positivas para S100 foram observadas na camada espinhosa &#40;corpos celulares&#41;&#44; seus dendritos se estendiam para as camadas suprabasal e para a c&#243;rnea&#44; tanto na epiderme saud&#225;vel &#40;grupo controle&#41;&#44; na epiderme peritumoral quanto na epiderme que recobre o tumor &#40;dermatofibroma&#41;&#46; N&#227;o foram observadas CL nas camadas granulosa e c&#243;rnea &#40;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0005">fig&#46; 1</a>&#41;&#46; As densidades das CL positivas para S100 foram 6&#44;00 &#177; 0&#44;29 na epiderme da pele saud&#225;vel e 6&#44;44 &#177; 0&#44;41 na epiderme peritumoral&#46; Nos dermatofibromas&#44; as densidades de CL positivas para S100 variaram entre a epiderme peritumoral e a epiderme que recobre o tumor&#46; A densidade m&#233;dia dessas c&#233;lulas na epiderme acima do dermatofibroma foi de 1&#44;44 &#177; 0&#44;33&#46; A diferen&#231;a de densidade de CL positivas para S100 entre a pele saud&#225;vel &#40;pele normal&#47;grupo controle e epiderme peritumoral&#41; e epiderme tumoral foi estatisticamente significante &#40;p&#160;&#60;&#160;0&#44;000&#59; fig&#46;&#160;1&#41;&#46;</p><elsevierMultimedia ident="fig0005"></elsevierMultimedia><p id="par0030" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Subsequentemente&#44; as CL foram examinadas e pontuadas na &#225;rea peritumoral saud&#225;vel adjacente da epiderme e na &#225;rea epid&#233;rmica que recobre as c&#233;lulas neopl&#225;sicas fibro&#8208;histioc&#237;ticas do dermatofibroma&#46; No presente estudo&#44; o n&#250;mero de CL que expressaram a mol&#233;cula S100 foi menor na epiderme que recobre o dermatofibroma do que nas amostras de pele peritumoral saud&#225;vel&#46; Essas varia&#231;&#245;es confirmam o d&#233;ficit quantitativo das CL como um poss&#237;vel fator no desenvolvimento do dermatofibroma e s&#227;o similares aos resultados de estudos anteriores em outros tumores de pele&#46;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0080"><span class="elsevierStyleSup">6</span></a> Shevchuk et al&#46; examinaram os valores de express&#227;o de CL por meio de anticorpos contra CD1a e langerina &#40;marcadores fenot&#237;picos para LCs&#41; com imuno&#8208;histoqu&#237;micos em pele saud&#225;vel&#44; ceratose act&#237;nica&#44; carcinoma basocelular e carcinoma espinocelular&#46; Em compara&#231;&#227;o com a pele normal&#44; a densidade de CL foi menor no carcinoma basocelular e carcinoma espinocelular&#46;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0080"><span class="elsevierStyleSup">6</span></a></p><p id="par0035" class="elsevierStylePara elsevierViewall">O aumento da densidade de CL na epiderme peritumoral do dermatofibroma sugere forte resposta imunol&#243;gica dessa &#225;rea para impedir o crescimento do tumor&#44; resulta em uma forma mais localizada e restrita da prolifera&#231;&#227;o fibro&#8208;histioc&#237;tica d&#233;rmica&#46; Essa suprarregula&#231;&#227;o das CL pode ser devida a altera&#231;&#245;es nos fatores de crescimento e citocinas&#44;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0085"><span class="elsevierStyleSup">7</span></a> apoptose e nos efeitos citot&#243;xicos diretos das c&#233;lulas tumorais&#46; V&#225;rias prote&#237;nas est&#227;o associadas ao desenvolvimento&#44; &#224; diferencia&#231;&#227;o e manuten&#231;&#227;o de CL&#44; entre as quais o fator de crescimento transformador beta &#40;TGF&#946;&#41;&#44; IL&#8208;34&#44; BMP&#8208;7&#44; integrina &#40;ITG&#41; avb6 e ITGavb8&#46;<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0085"><span class="elsevierStyleSup">7&#44;8</span></a> Esse autor prop&#245;e que o aumento da densidade de CL na epiderme peritumoral do dermatofibroma se deve &#224; suprarregula&#231;&#227;o dessas mol&#233;culas&#46; As ativinas A &#40;membros da fam&#237;lia TGF&#946;&#41; podem induzir a diferencia&#231;&#227;o de mon&#243;citos humanos em CL e&#44; portanto&#44; s&#227;o importantes para preencher a epiderme com CL&#46;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0095"><span class="elsevierStyleSup">9</span></a> Prurido &#40;trauma mec&#226;nico&#41; e altera&#231;&#245;es inflamat&#243;rias sobrepostas s&#227;o eventos comuns associados ao dermatofibroma &#40;dermatofibroma irritado ou inflamado&#41;&#46; &#201; poss&#237;vel que o trauma mec&#226;nico e a resposta inflamat&#243;ria associada sejam os mecanismos subjacentes &#224; perda de CL na epiderme que cobre o tumor&#46; Como respaldo a essa hip&#243;tese&#44; as CL deixam a epiderme em resposta a est&#237;mulos inflamat&#243;rios ou a remo&#231;&#227;o delicada com fita adesiva &#40;<span class="elsevierStyleItalic">tape stripping</span>&#41;&#46;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0100"><span class="elsevierStyleSup">10</span></a> Tamb&#233;m &#233; poss&#237;vel que as c&#233;lulas neopl&#225;sicas do dermatofibroma exer&#231;am efeitos citot&#243;xicos diretos nas CL&#59; a perda dessas c&#233;lulas pode ser reflexo desses efeitos&#46;</p><p id="par0040" class="elsevierStylePara elsevierViewall">O presente estudo observou redu&#231;&#227;o no n&#250;mero de CL epid&#233;rmicas positivas para S100 sobre as &#225;reas do tumor em compara&#231;&#227;o com o observado na epiderme peritumoral&#46; &#201; importante avaliar as altera&#231;&#245;es das mol&#233;culas que contribuem para o d&#233;ficit quantitativo de CL na epiderme que cobre o dermatofibroma&#44; como TGF&#946;&#44; IL&#8208;34&#44; BMP&#8208;7&#44; ITGavb6 e ITGavb8&#46;<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0085"><span class="elsevierStyleSup">7&#44;8</span></a></p><span id="sec0020" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0015">Suporte financeiro</span><p id="par0060" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Nenhum&#46;</p></span><span id="sec0005" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0020">Contribui&#231;&#227;o do autor</span><p id="par0045" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Mahmoud Rezk Abdelwhaed Hussein&#58; An&#225;lise estat&#237;stica&#59; aprova&#231;&#227;o da vers&#227;o final do manuscrito&#59; concep&#231;&#227;o e planejamento do estudo&#59; elabora&#231;&#227;o e reda&#231;&#227;o do manuscrito&#59; obten&#231;&#227;o&#44; an&#225;lise e interpreta&#231;&#227;o dos dados&#59; participa&#231;&#227;o efetiva na orienta&#231;&#227;o da pesquisa&#59; participa&#231;&#227;o intelectual em conduta proped&#234;utica e&#47;ou terap&#234;utica de casos estudados&#59; revis&#227;o cr&#237;tica da literatura&#59; revis&#227;o cr&#237;tica do manuscrito&#46;</p></span><span id="sec0015" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0025">Conflitos de interesse</span><p id="par0055" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Nenhum&#46;</p></span></span>"
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Vol. 95. Issue 5.
Pages 627-630 (1 September 2020)
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7956
Vol. 95. Issue 5.
Pages 627-630 (1 September 2020)
Dermatopatologia
Open Access
Análise imuno‐histoquímica das células de Langerhans epidérmicas positivas para S100 no dermatofibroma
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Mahmoud Rezk Abdelwhaed Hussein
Departamento de Patologia, Assuit University Hospital, Assuit, Egito
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Resumo

O dermatofibroma é neoplasia fibro‐histiocítica dérmica. As células de Langerhans são as células imunocompetentes da epiderme e representam a primeira barreira de defesa do sistema imunológico em relação ao meio ambiente. Este estudo teve como objetivo comparar imuno‐histologicamente a densidade das células de Langerhans positivas para S100 na epiderme peritumoral saudável com as células da epiderme sobrejacente a dermatofibromas (20 casos), usaram‐se anticorpos contra a molécula S100 (um marcador imunofenotípico das células de Langerhans). O grupo controle (pele normal e saudável) incluiu 10 indivíduos saudáveis, pareados por sexo e idade, que foram submetidos a biópsias de lesões cutâneas benignas. Observou‐se densidade significativamente alta das células de Langerhans na epiderme da pele saudável (6,00 ± 0,29) e na epiderme peritumoral (6,44 ± 0,41) quando comparadas àquelas na epiderme que recobria o tumor (1,44 ± 0,33; p < 0,05). O déficit quantitativo das células de Langerhans na epiderme sobrejacente ao dermatofibroma pode ser um fator possível em seu desenvolvimento.

Palavras‐chave:
Histiocitoma fibroso benigno
Neoplasias cutâneas
Proteínas S100
Full Text

As células de Langerhans (CL) são as células apresentadoras de antígeno exclusivas da epiderme humana normal. Elas se originam de duas fontes: do saco vitelino extraembrionário e de precursores (monócitos) no fígado fetal. As CL representam cerca de 3% da população celular na epiderme e são vistas em cortes histológicos corados com hematoxilina e eosina como “células claras” nas camadas suprabasais. A expressão de CD1a, langerina e S100 são os marcadores imunofenotípicos que distinguem as CL de outras células dendríticas.1

As CL desempenham papel relevante na vigilância imunológica e, após a ativação, migram da epiderme para os linfonodos. As CL podem capturar antígenos, ativar células T indiferenciadas (naive) e desencadear uma resposta imune específica de células T com sua expansão e diferenciação clonal em células T efetoras e de memória.2 Alterações na distribuição das CL ocorrem na epiderme peritumoral e na epiderme que cobre os tumores dérmicos.3 Dermatofibroma é um tumor dermatológico comum que geralmente afeta os membros inferiores de mulheres. Alguns autores consideram o dermatofibroma um processo reativo, mas outros o consideram tumor benigno de fibroblastos, miofibroblastos ou mesmo dendrócitos dérmicos.4 O presente estudo compara a densidade de CL positivas para S100 na epiderme peritumoral e na epiderme que recobre as células neoplásicas no dermatofibroma.

Este estudo retrospectivo incluiu amostras de pele fixadas em formalina e emblocadas em parafina de 20 casos de dermatofibroma. A idade média dos pacientes foi de 49,40 ± 3,34 anos. As amostras foram coletadas de pacientes sem histórico de alterações imunológicas. O grupo controle (pele normal e saudável) incluiu 10 indivíduos saudáveis, pareados por sexo e idade, submetidos a biópsias de pele por lesões benignas, bem como a pele peritumoral saudável (pele saudável adjacente aos tumores). Os tecidos fixados em formalina e emblocados em parafina foram submetidos a análise imuno‐histológica para CL com anticorpos contra o antígeno S100, usou‐se o método da peroxidase/diaminobenzidina, similarmente a estudo anterior.5 Os controles externos incluíram melanoma (para S100). Os controles negativos incluíram cortes histológicos que não foram incubados com os anticorpos primários (substituídos por PBS).5 Os controles positivos e negativos produziram resultados positivos e negativos, respectivamente, indicaram a validade dos resultados.

As células imunorreativas com S100 foram contadas com microscópio óptico Olympus, como relatado por outros grupos.6 As imagens foram feitas com câmera digital DFC450. A epiderme foi examinada sob pequeno aumento e os hot spots foram identificados. As CL positivas para S100 em cada 1.000 células epidérmicas foram contadas com aumento de ×400. As CL imunorreativas com imunocoloração marrom ou vermelha e um núcleo visível foram consideradas positivas, bem como os dendritos. Os resultados foram relatados como média e erro padrão das médias. Foi usado o teste t de Student, com p < 0,05 considerado estatisticamente significativo.

CL positivas para S100 foram observadas na camada espinhosa (corpos celulares), seus dendritos se estendiam para as camadas suprabasal e para a córnea, tanto na epiderme saudável (grupo controle), na epiderme peritumoral quanto na epiderme que recobre o tumor (dermatofibroma). Não foram observadas CL nas camadas granulosa e córnea (fig. 1). As densidades das CL positivas para S100 foram 6,00 ± 0,29 na epiderme da pele saudável e 6,44 ± 0,41 na epiderme peritumoral. Nos dermatofibromas, as densidades de CL positivas para S100 variaram entre a epiderme peritumoral e a epiderme que recobre o tumor. A densidade média dessas células na epiderme acima do dermatofibroma foi de 1,44 ± 0,33. A diferença de densidade de CL positivas para S100 entre a pele saudável (pele normal/grupo controle e epiderme peritumoral) e epiderme tumoral foi estatisticamente significante (p < 0,000; fig. 1).

Figura 1.

Paciente do sexo masculino, 35 anos, com lesão ceratótica na coxa esquerda. A observação clínica incluiu dermatofibroma e acantoma no diagnóstico diferencial. (A‐D), histologicamente, observa‐se epiderme hiperparaceratótica sobrejacente a uma proliferação dérmica mal delimitada, composta por células fusiformes intersticiais mitoticamente inativas. Algumas áreas do tumor (porção superior) eram densamente celulares, enquanto outras (porções média e inferior) eram escleróticas e hipocelulares. A epiderme sobrejacente se apresenta atenuada sobre o tumor quando comparada à epiderme peritumoral hiperplásica. Dentro do tumor, observa‐se aprisionamento de colágeno, vasos de paredes finas e hemorragia. (E‐H), epiderme peritumoral que mostra várias células de Langerhans positivas para S100 localizadas principalmente na camada espinhosa. As células de Langerhans estão quase ausentes na epiderme que cobre o tumor. Ampliações: A e E, 20×; B e F, 40×; C e G, 100 ×; D e H, 400×.

(0.73MB).

Subsequentemente, as CL foram examinadas e pontuadas na área peritumoral saudável adjacente da epiderme e na área epidérmica que recobre as células neoplásicas fibro‐histiocíticas do dermatofibroma. No presente estudo, o número de CL que expressaram a molécula S100 foi menor na epiderme que recobre o dermatofibroma do que nas amostras de pele peritumoral saudável. Essas variações confirmam o déficit quantitativo das CL como um possível fator no desenvolvimento do dermatofibroma e são similares aos resultados de estudos anteriores em outros tumores de pele.6 Shevchuk et al. examinaram os valores de expressão de CL por meio de anticorpos contra CD1a e langerina (marcadores fenotípicos para LCs) com imuno‐histoquímicos em pele saudável, ceratose actínica, carcinoma basocelular e carcinoma espinocelular. Em comparação com a pele normal, a densidade de CL foi menor no carcinoma basocelular e carcinoma espinocelular.6

O aumento da densidade de CL na epiderme peritumoral do dermatofibroma sugere forte resposta imunológica dessa área para impedir o crescimento do tumor, resulta em uma forma mais localizada e restrita da proliferação fibro‐histiocítica dérmica. Essa suprarregulação das CL pode ser devida a alterações nos fatores de crescimento e citocinas,7 apoptose e nos efeitos citotóxicos diretos das células tumorais. Várias proteínas estão associadas ao desenvolvimento, à diferenciação e manutenção de CL, entre as quais o fator de crescimento transformador beta (TGFβ), IL‐34, BMP‐7, integrina (ITG) avb6 e ITGavb8.7,8 Esse autor propõe que o aumento da densidade de CL na epiderme peritumoral do dermatofibroma se deve à suprarregulação dessas moléculas. As ativinas A (membros da família TGFβ) podem induzir a diferenciação de monócitos humanos em CL e, portanto, são importantes para preencher a epiderme com CL.9 Prurido (trauma mecânico) e alterações inflamatórias sobrepostas são eventos comuns associados ao dermatofibroma (dermatofibroma irritado ou inflamado). É possível que o trauma mecânico e a resposta inflamatória associada sejam os mecanismos subjacentes à perda de CL na epiderme que cobre o tumor. Como respaldo a essa hipótese, as CL deixam a epiderme em resposta a estímulos inflamatórios ou a remoção delicada com fita adesiva (tape stripping).10 Também é possível que as células neoplásicas do dermatofibroma exerçam efeitos citotóxicos diretos nas CL; a perda dessas células pode ser reflexo desses efeitos.

O presente estudo observou redução no número de CL epidérmicas positivas para S100 sobre as áreas do tumor em comparação com o observado na epiderme peritumoral. É importante avaliar as alterações das moléculas que contribuem para o déficit quantitativo de CL na epiderme que cobre o dermatofibroma, como TGFβ, IL‐34, BMP‐7, ITGavb6 e ITGavb8.7,8

Suporte financeiro

Nenhum.

Contribuição do autor

Mahmoud Rezk Abdelwhaed Hussein: Análise estatística; aprovação da versão final do manuscrito; concepção e planejamento do estudo; elaboração e redação do manuscrito; obtenção, análise e interpretação dos dados; participação efetiva na orientação da pesquisa; participação intelectual em conduta propedêutica e/ou terapêutica de casos estudados; revisão crítica da literatura; revisão crítica do manuscrito.

Conflitos de interesse

Nenhum.

Referências
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Como citar este artigo: Hussein MRA. Immunohistochemical analysis of S100‐positive epidermal Langerhans cells in dermatofibroma. An Bras Dermatol. 2020;95:627–30.

Trabalho realizado no Departamento de Patologia, Assuit University Hospital, Assuit University, Assuit, Egito.

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