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e outras prote&#237;nas associadas&#44; a exemplo do fator de transcri&#231;&#227;o CHOP &#40;FTCHOP&#41;&#46;</p><p id="par0010" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Diante disso&#44; o presente estudo buscou demonstrar os efeitos da insulina administrada em camundongos com melanoma&#44; a rela&#231;&#227;o da resposta tumoral com a glicemia sangu&#237;nea e a express&#227;o proteica possivelmente envolvida nesse mecanismo&#46;</p><p id="par0015" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Todos os procedimentos foram aprovados pelo Comit&#234; de &#201;tica em Uso de Animais &#40;n&#176; 23075&#46;067738&#47;2019&#8208;05&#41;&#46; Linhagens celulares de melanoma murino &#40;B16&#8208;F10&#41; foram obtidas da American Type Culture Collection &#40;ATCC &#8211; Manassas&#44; VA&#44; EUA&#41;&#44; cultivadas em meio DMEM e injetados subcutaneamente &#40;6<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#215;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>10<span class="elsevierStyleSup">6</span> c&#233;lulas por animal&#41; em camundongos C57BL&#47;6&#44; machos&#44; com 8 a 12 semanas &#40;obtidos junto ao Instituto Carlos Chagas&#44; FioCruz &#8211; Paran&#225;&#41;&#44; totalizando 50 animais&#46; Os camundongos foram alimentados com dieta padr&#227;o &#40;Purina&#41; durante os experimentos&#46; Ap&#243;s cinco dias&#44; percebeu&#8208;se o desenvolvimento de tumor s&#243;lido de tamanho vari&#225;vel no local da aplica&#231;&#227;o&#46; Insulina regular humana 100 UI&#47;mL &#40;Novolin R&#174;&#41; foi utilizada para o tratamento dos animais&#44; dilu&#237;da em soro glicosado 50&#37;&#46; Os camundongos foram divididos em quatro grupos&#44; de acordo com o tratamento&#58; 15 camundongos no grupo controle &#40;0&#44;1 mL de soro glicosado 50&#37;&#41;&#59; 10 camundongos grupo 1UI&#47;kg &#40;0&#44;1 mL de solu&#231;&#227;o a 0&#44;1 UI&#47;mL&#41;&#59; 10 camundongos grupo 2UI&#47;kg &#40;0&#44;1 mL de solu&#231;&#227;o a 0&#44;2 UI&#47;kg&#41;&#59; e 15 camundongos grupo 4UI&#47;kg &#40;0&#44;1 de solu&#231;&#227;o a 0&#44;4 UI&#47;mL&#41;&#46; Foi administrada insulina intraperitonealmente por um total de 15 dias&#44; divididos em tr&#234;s ciclos de cinco dias&#44; com intervalos de dois dias sem a administra&#231;&#227;o do horm&#244;nio &#40;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#sec0020">Material Suplementar 1</a>&#41;&#46; Os n&#237;veis glic&#234;micos foram medidos usando medidor de glicose &#40;Accu Check Active&#44; Roche Diagnostic&#44; Alemanha&#41;&#44; por meio de amostra sangu&#237;nea obtida atrav&#233;s de um pequeno corte na cauda&#46; A coleta ocorreu apenas nos grupos controle&#44; grupo 2UI e grupo 4UI&#44; tr&#234;s vezes por semana&#46; Ap&#243;s o fim do tratamento&#44; os animais foram sacrificados&#44; utilizando&#8208;se a combina&#231;&#227;o de cloridrato de xilazina e cloridrato de quetamina &#40;10&#37;&#41; em 50 mcL &#40;1&#58;1&#41;&#46;</p><p id="par0020" class="elsevierStylePara elsevierViewall">O tecido tumoral foi extra&#237;do e a an&#225;lise imuno&#8208;histoqu&#237;mica foi realizada a partir de l&#226;minas de sec&#231;&#245;es tumorais dos tumores de B16&#8208;F10 obtidos nos experimentos <span class="elsevierStyleItalic">in vivo</span>&#46; 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Foi realizada a compara&#231;&#227;o pelo teste de Kruskal&#8208;Wallis e revisado pelo teste de Dunn para os tamanhos tumorais e para a express&#227;o de prote&#237;nas&#44; a contagem de n&#250;cleos e a &#225;rea corada nas l&#226;minas&#46; Os n&#237;veis glic&#234;micos n&#227;o foram contemplados pela an&#225;lise estat&#237;stica&#44; uma vez que o objetivo do estudo n&#227;o era demonstrar diferen&#231;as entre os grupos nessa vari&#225;vel&#44; mas sim a aus&#234;ncia de hipoglicemia grave&#46;</p><p id="par0030" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Os efeitos da insulina <span class="elsevierStyleItalic">in vivo</span> foram analisados a partir do modelo animal&#44; com a mensura&#231;&#227;o do tamanho dos tumores ao final do tratamento&#46; O gr&#225;fico de <span class="elsevierStyleItalic">box&#8208;plot</span> do tamanho dos tumores est&#225; representado na <a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0005">figura 1A</a>&#44; enquanto os n&#237;veis glic&#234;mico obtidos nos animais est&#227;o representados na <a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0005">figura 1B</a>&#44; considerando os valores de refer&#234;ncia para os camundongos &#40;150 mg&#47;dL&#41;&#46;</p><elsevierMultimedia ident="fig0005"></elsevierMultimedia><p id="par0035" class="elsevierStylePara elsevierViewall">O n&#250;mero de animais mortos durante os experimentos foi de dois do grupo controle e quatro do grupo 1UI&#47;kg&#46; As mortes foram decorrentes da progress&#227;o tumoral nos animais&#46; Essas mortes foram observadas ao longo da segunda semana dos experimentos&#44; e os tumores desses animais n&#227;o foram analisados&#46;</p><p id="par0040" class="elsevierStylePara elsevierViewall">A express&#227;o de F4AT &#40;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0010">fig&#46; 2A&#8208;B</a>&#41; estava aumentada nos grupos 2UI&#47;kg e 4UI&#47;kg quando comparada com o grupo controle&#44; com relev&#226;ncia estat&#237;stica&#46; As imagens obtidas para avalia&#231;&#227;o de FTCHOP &#40;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0010">fig&#46; 2C&#8208;D</a>&#41; demonstraram diferen&#231;a estat&#237;stica com o grupo 4UI em compara&#231;&#227;o com o grupo controle &#40;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0015">fig&#46; 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a&#231;&#227;o antineopl&#225;sica&#44; em vez da hipoglicemia&#46; O F4AT desempenha papel dual dentro da c&#233;lula em situa&#231;&#245;es de estresse do ret&#237;culo endoplasm&#225;tico &#40;ERS&#41;&#44;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0085"><span class="elsevierStyleSup">7</span></a> promovendo a sobreviv&#234;ncia celular ou iniciando a apoptose&#44; sobretudo pela via PERK&#47;eIF2a&#47;F4AT&#47;FTCHOP&#46; A literatura estipula que a insulina esteja ligada &#224; express&#227;o do F4AT em c&#233;lulas saud&#225;veis<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0090"><span class="elsevierStyleSup">8</span></a> e tumorais&#44;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0095"><span class="elsevierStyleSup">9</span></a> e esses dados s&#227;o corroborados com achados do presente artigo&#46; A express&#227;o do FTCHOP apenas no grupo 4UI pode estar relacionada &#224; quantidade de material tumoral nas l&#226;minas do grupo 2UI&#44; observada pelo percentual corado&#44; bem como por outras vias para indu&#231;&#227;o da apoptose nas c&#233;lulas&#44; como pela prote&#237;na TRAIL&#46;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0100"><span class="elsevierStyleSup">10</span></a></p><p id="par0055" class="elsevierStylePara elsevierViewall">As limita&#231;&#245;es do presente estudo correspondem ao fato de n&#227;o ser avaliado se os tumores se tornariam refrat&#225;rios ao uso de insulina ou se haveria recidivas&#46; N&#227;o foram avaliados o peso dos animais&#44; o poss&#237;vel aumento da massa corporal nos grupos tratados com insulina&#44; o tempo de sobrevida dos animais ap&#243;s o tratamento nem a presen&#231;a de outros marcadores celulares que poderiam estar envolvidos nos processos&#44; como a prote&#237;na TRAIL&#46; Outra limita&#231;&#227;o &#233; a avalia&#231;&#227;o da express&#227;o de prote&#237;nas por meio de l&#226;minas imuno&#8208;histoqu&#237;micas&#46;</p><span id="sec0005" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0005">Suporte financeiro</span><p id="par0060" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Nenhum&#46;</p></span><span id="sec0010" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0010">Contribui&#231;&#227;o dos autores</span><p id="par0065" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Daniel do Prado&#58; Concebeu a ideia deste trabalho&#59; desenvolveu a teoria por tr&#225;s dos experimentos&#59; planejou o trabalho&#59; escreveu o manuscrito&#59; realizou a an&#225;lise estat&#237;stica e analisou os dados&#46;</p><p id="par0070" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Marianna Boia&#58; Cuidou dos experimentos&#59; Contribuiu para a prepara&#231;&#227;o das amostras e para interpreta&#231;&#227;o dos dados&#46;</p><p id="par0075" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Hanna Camara da Justa&#58; Participou dos experimentos&#46;</p><p id="par0080" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Andrea Senff Ribeiro&#58; Contribuiu para a interpreta&#231;&#227;o dos resultados e supervisionou o projeto&#46;</p><p id="par0085" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Sergio Lunardon Padilha&#58; Contribuiu para a interpreta&#231;&#227;o dos resultados e supervisionou o projeto&#46;</p></span><span id="sec0015" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0015">Conflito de interesses</span><p id="par0090" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Nenhum&#46;</p></span></span>"
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                  \t\t\t\t" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t\t\t</th><th class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">Controle&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t\t\t</th><th class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">1UI&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t\t\t</th><th class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">2UI&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t\t\t</th><th class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">4UI&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t\t\t</th><th class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">Valor&#8208;p &#40;teste de Kruskal&#8208;Wallis&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t\t\t</th></tr></thead><tbody title="tbody"><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t"><span class="elsevierStyleBold">M&#233;dia de &#225;rea de IHQ</span></td></tr><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="\n
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                  \t\t\t\t">F4AT&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">7&#44;6&#37;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">2&#44;0&#37;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">20&#44;0&#37;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#tblfn0005">&#42;</a>&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">14&#44;17&#37;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#tblfn0005">&#42;</a>&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">&#62; 0&#44;05&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t"><span class="elsevierStyleBold">N&#250;mero de n&#250;cleos por l&#226;mina &#40;m&#233;dia&#41;</span></td></tr><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="\n
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                  \t\t\t\t">F4AT&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t">1614&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">1345&#44;7&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">721&#44;0<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#tblfn0005">&#42;</a>&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">114&#44;5<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#tblfn0005">&#42;</a>&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">&#62; 0&#44;05&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t"><span class="elsevierStyleBold">M&#233;dia de &#225;rea de IHQ</span></td></tr><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="\n
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                  \t\t\t\t">FTCHOP&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t">1&#44;7&#37;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">4&#44;4&#37;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#tblfn0005">&#42;</a>&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">2&#44;4&#37;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">1&#44;5&#37;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">&#62; 0&#44;05&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t"><span class="elsevierStyleBold">N&#250;mero de n&#250;cleos por l&#226;mina &#40;m&#233;dia&#41;</span></td></tr><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="\n
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                  \t\t\t\t">FTCHOP&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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Cartas ‐ Investigação
Insulina inibe o crescimento tumoral de melanoma pela expressão do fator 4 ativador da transcrição, sem expressão detectável de fator de transcrição, CHOP: modelo in vivo
Daniel do Pradoa,
Corresponding author
danieldoprado1@gmail.com

Autor para correspondência.
, Marianna Boia‐Ferreiaa, Hanna Camara da Justab, Andrea Senff‐Ribeirob, Sérgio Lunardon Padilhaa
a Departamento de Medicina Interna, Universidade Federal do Paraná, Curitiba, PR, Brasil
b Departamento de Biologia Celular, Universidade Federal do Paraná, Curitiba, PR, Brasil
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e outras prote&#237;nas associadas&#44; a exemplo do fator de transcri&#231;&#227;o CHOP &#40;FTCHOP&#41;&#46;</p><p id="par0010" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Diante disso&#44; o presente estudo buscou demonstrar os efeitos da insulina administrada em camundongos com melanoma&#44; a rela&#231;&#227;o da resposta tumoral com a glicemia sangu&#237;nea e a express&#227;o proteica possivelmente envolvida nesse mecanismo&#46;</p><p id="par0015" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Todos os procedimentos foram aprovados pelo Comit&#234; de &#201;tica em Uso de Animais &#40;n&#176; 23075&#46;067738&#47;2019&#8208;05&#41;&#46; Linhagens celulares de melanoma murino &#40;B16&#8208;F10&#41; foram obtidas da American Type Culture Collection &#40;ATCC &#8211; Manassas&#44; VA&#44; EUA&#41;&#44; cultivadas em meio DMEM e injetados subcutaneamente &#40;6<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#215;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>10<span class="elsevierStyleSup">6</span> c&#233;lulas por animal&#41; em camundongos C57BL&#47;6&#44; machos&#44; com 8 a 12 semanas &#40;obtidos junto ao Instituto Carlos Chagas&#44; FioCruz &#8211; Paran&#225;&#41;&#44; totalizando 50 animais&#46; Os camundongos foram alimentados com dieta padr&#227;o &#40;Purina&#41; durante os experimentos&#46; Ap&#243;s cinco dias&#44; percebeu&#8208;se o desenvolvimento de tumor s&#243;lido de tamanho vari&#225;vel no local da aplica&#231;&#227;o&#46; Insulina regular humana 100 UI&#47;mL &#40;Novolin R&#174;&#41; foi utilizada para o tratamento dos animais&#44; dilu&#237;da em soro glicosado 50&#37;&#46; Os camundongos foram divididos em quatro grupos&#44; de acordo com o tratamento&#58; 15 camundongos no grupo controle &#40;0&#44;1 mL de soro glicosado 50&#37;&#41;&#59; 10 camundongos grupo 1UI&#47;kg &#40;0&#44;1 mL de solu&#231;&#227;o a 0&#44;1 UI&#47;mL&#41;&#59; 10 camundongos grupo 2UI&#47;kg &#40;0&#44;1 mL de solu&#231;&#227;o a 0&#44;2 UI&#47;kg&#41;&#59; e 15 camundongos grupo 4UI&#47;kg &#40;0&#44;1 de solu&#231;&#227;o a 0&#44;4 UI&#47;mL&#41;&#46; Foi administrada insulina intraperitonealmente por um total de 15 dias&#44; divididos em tr&#234;s ciclos de cinco dias&#44; com intervalos de dois dias sem a administra&#231;&#227;o do horm&#244;nio &#40;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#sec0020">Material Suplementar 1</a>&#41;&#46; Os n&#237;veis glic&#234;micos foram medidos usando medidor de glicose &#40;Accu Check Active&#44; Roche Diagnostic&#44; Alemanha&#41;&#44; por meio de amostra sangu&#237;nea obtida atrav&#233;s de um pequeno corte na cauda&#46; A coleta ocorreu apenas nos grupos controle&#44; grupo 2UI e grupo 4UI&#44; tr&#234;s vezes por semana&#46; Ap&#243;s o fim do tratamento&#44; os animais foram sacrificados&#44; utilizando&#8208;se a combina&#231;&#227;o de cloridrato de xilazina e cloridrato de quetamina &#40;10&#37;&#41; em 50 mcL &#40;1&#58;1&#41;&#46;</p><p id="par0020" class="elsevierStylePara elsevierViewall">O tecido tumoral foi extra&#237;do e a an&#225;lise imuno&#8208;histoqu&#237;mica foi realizada a partir de l&#226;minas de sec&#231;&#245;es tumorais dos tumores de B16&#8208;F10 obtidos nos experimentos <span class="elsevierStyleItalic">in vivo</span>&#46; Foi realizada a prepara&#231;&#227;o das l&#226;minas de imuno&#8208;histoqu&#237;mica segundo protocolo indexado &#40;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#sec0020">Material Suplementar 2</a>&#41; e utilizado anticorpos prim&#225;rios&#44; anti&#8208;FTCHOP para ratos &#40;Santa Cruz Biotechnology&#44; cat&#46;sc 7351&#41; e anti&#8208;F4AT para ratos &#40;Santa Cruz Biotechnology&#44; cat&#46;sc 390063&#41;&#46; A quantifica&#231;&#227;o imuno&#8208;histoqu&#237;mica foi realizado no programa ImageJ Analisys Software&#44; com o protocolo de Crowe and Yue&#46;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0070"><span class="elsevierStyleSup">4</span></a> L&#226;minas de controle foram utilizadas para determinar par&#226;metros b&#225;sicos e serviram como referencial para a express&#227;o relativa&#46; Tamb&#233;m se avaliou &#225;rea de imuno&#8208;histoqu&#237;mica expressa e o n&#250;mero de n&#250;cleos por campo de l&#226;mina avaliado&#46; Foram utilizados tr&#234;s campos com amplia&#231;&#227;o de 20<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#215;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>por l&#226;mina para a an&#225;lise&#46;</p><p id="par0025" class="elsevierStylePara elsevierViewall">A an&#225;lise estat&#237;stica e os gr&#225;ficos foram feitos no programa R &#40;R Development Core Team&#41;&#46; Foi realizada a compara&#231;&#227;o pelo teste de Kruskal&#8208;Wallis e revisado pelo teste de Dunn para os tamanhos tumorais e para a express&#227;o de prote&#237;nas&#44; a contagem de n&#250;cleos e a &#225;rea corada nas l&#226;minas&#46; Os n&#237;veis glic&#234;micos n&#227;o foram contemplados pela an&#225;lise estat&#237;stica&#44; uma vez que o objetivo do estudo n&#227;o era demonstrar diferen&#231;as entre os grupos nessa vari&#225;vel&#44; mas sim a aus&#234;ncia de hipoglicemia grave&#46;</p><p id="par0030" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Os efeitos da insulina <span class="elsevierStyleItalic">in vivo</span> foram analisados a partir do modelo animal&#44; com a mensura&#231;&#227;o do tamanho dos tumores ao final do tratamento&#46; O gr&#225;fico de <span class="elsevierStyleItalic">box&#8208;plot</span> do tamanho dos tumores est&#225; representado na <a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0005">figura 1A</a>&#44; enquanto os n&#237;veis glic&#234;mico obtidos nos animais est&#227;o representados na <a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0005">figura 1B</a>&#44; considerando os valores de refer&#234;ncia para os camundongos &#40;150 mg&#47;dL&#41;&#46;</p><elsevierMultimedia ident="fig0005"></elsevierMultimedia><p id="par0035" class="elsevierStylePara elsevierViewall">O n&#250;mero de animais mortos durante os experimentos foi de dois do grupo controle e quatro do grupo 1UI&#47;kg&#46; As mortes foram decorrentes da progress&#227;o tumoral nos animais&#46; Essas mortes foram observadas ao longo da segunda semana dos experimentos&#44; e os tumores desses animais n&#227;o foram analisados&#46;</p><p id="par0040" class="elsevierStylePara elsevierViewall">A express&#227;o de F4AT &#40;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0010">fig&#46; 2A&#8208;B</a>&#41; estava aumentada nos grupos 2UI&#47;kg e 4UI&#47;kg quando comparada com o grupo controle&#44; com relev&#226;ncia estat&#237;stica&#46; As imagens obtidas para avalia&#231;&#227;o de FTCHOP &#40;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0010">fig&#46; 2C&#8208;D</a>&#41; demonstraram diferen&#231;a estat&#237;stica com o grupo 4UI em compara&#231;&#227;o com o grupo controle &#40;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0015">fig&#46; 3</a>&#41;&#46; Na an&#225;lise qualitativa das l&#226;minas&#44; observou&#8208;se ma menor contagem de n&#250;cleos nos grupos tratados e maior &#225;rea corada nos grupos 4UI &#40;F4AT&#41; e 1UI &#40;FTCHOP&#41; &#8211; <a class="elsevierStyleCrossRef" href="#tbl0005">tabela 1</a>&#46;</p><elsevierMultimedia ident="fig0010"></elsevierMultimedia><elsevierMultimedia ident="fig0015"></elsevierMultimedia><elsevierMultimedia ident="tbl0005"></elsevierMultimedia><p id="par0045" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Apesar de a literatura moderna estabelecer um papel neopl&#225;sico para a insulina&#44; de modo que o uso do horm&#244;nio esteja relacionado ao surgimento&#47;crescimento tumoral&#44;<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0075"><span class="elsevierStyleSup">5&#44;6</span></a> o presente estudo encontra respaldo em dados do in&#237;cio do s&#233;culo XX&#44;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0055"><span class="elsevierStyleSup">1</span></a> em que a insulina apresentou atividade antineopl&#225;sica&#46;</p><p id="par0050" class="elsevierStylePara elsevierViewall">A express&#227;o proteica de F4AT mediada pela insulina parece estar relacionada &#224; a&#231;&#227;o antineopl&#225;sica&#44; em vez da hipoglicemia&#46; O F4AT desempenha papel dual dentro da c&#233;lula em situa&#231;&#245;es de estresse do ret&#237;culo endoplasm&#225;tico &#40;ERS&#41;&#44;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0085"><span class="elsevierStyleSup">7</span></a> promovendo a sobreviv&#234;ncia celular ou iniciando a apoptose&#44; sobretudo pela via PERK&#47;eIF2a&#47;F4AT&#47;FTCHOP&#46; A literatura estipula que a insulina esteja ligada &#224; express&#227;o do F4AT em c&#233;lulas saud&#225;veis<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0090"><span class="elsevierStyleSup">8</span></a> e tumorais&#44;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0095"><span class="elsevierStyleSup">9</span></a> e esses dados s&#227;o corroborados com achados do presente artigo&#46; A express&#227;o do FTCHOP apenas no grupo 4UI pode estar relacionada &#224; quantidade de material tumoral nas l&#226;minas do grupo 2UI&#44; observada pelo percentual corado&#44; bem como por outras vias para indu&#231;&#227;o da apoptose nas c&#233;lulas&#44; como pela prote&#237;na TRAIL&#46;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0100"><span class="elsevierStyleSup">10</span></a></p><p id="par0055" class="elsevierStylePara elsevierViewall">As limita&#231;&#245;es do presente estudo correspondem ao fato de n&#227;o ser avaliado se os tumores se tornariam refrat&#225;rios ao uso de insulina ou se haveria recidivas&#46; N&#227;o foram avaliados o peso dos animais&#44; o poss&#237;vel aumento da massa corporal nos grupos tratados com insulina&#44; o tempo de sobrevida dos animais ap&#243;s o tratamento nem a presen&#231;a de outros marcadores celulares que poderiam estar envolvidos nos processos&#44; como a prote&#237;na TRAIL&#46; Outra limita&#231;&#227;o &#233; a avalia&#231;&#227;o da express&#227;o de prote&#237;nas por meio de l&#226;minas imuno&#8208;histoqu&#237;micas&#46;</p><span id="sec0005" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0005">Suporte financeiro</span><p id="par0060" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Nenhum&#46;</p></span><span id="sec0010" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0010">Contribui&#231;&#227;o dos autores</span><p id="par0065" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Daniel do Prado&#58; Concebeu a ideia deste trabalho&#59; desenvolveu a teoria por tr&#225;s dos experimentos&#59; planejou o trabalho&#59; escreveu o manuscrito&#59; realizou a an&#225;lise estat&#237;stica e analisou os dados&#46;</p><p id="par0070" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Marianna Boia&#58; Cuidou dos experimentos&#59; Contribuiu para a prepara&#231;&#227;o das amostras e para interpreta&#231;&#227;o dos dados&#46;</p><p id="par0075" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Hanna Camara da Justa&#58; Participou dos experimentos&#46;</p><p id="par0080" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Andrea Senff Ribeiro&#58; Contribuiu para a interpreta&#231;&#227;o dos resultados e supervisionou o projeto&#46;</p><p id="par0085" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Sergio Lunardon Padilha&#58; Contribuiu para a interpreta&#231;&#227;o dos resultados e supervisionou o projeto&#46;</p></span><span id="sec0015" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0015">Conflito de interesses</span><p id="par0090" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Nenhum&#46;</p></span></span>"
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                  \t\t\t\t" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t\t\t</th><th class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">Controle&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t\t\t</th><th class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">1UI&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t\t\t</th><th class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">2UI&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t\t\t</th><th class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">4UI&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">Valor&#8208;p &#40;teste de Kruskal&#8208;Wallis&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t\t\t</th></tr></thead><tbody title="tbody"><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t"><span class="elsevierStyleBold">M&#233;dia de &#225;rea de IHQ</span></td></tr><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="\n
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                  \t\t\t\t">7&#44;6&#37;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">2&#44;0&#37;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t">20&#44;0&#37;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#tblfn0005">&#42;</a>&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">14&#44;17&#37;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#tblfn0005">&#42;</a>&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t">&#62; 0&#44;05&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t"><span class="elsevierStyleBold">N&#250;mero de n&#250;cleos por l&#226;mina &#40;m&#233;dia&#41;</span></td></tr><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="\n
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                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">1614&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">1345&#44;7&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">721&#44;0<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#tblfn0005">&#42;</a>&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">114&#44;5<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#tblfn0005">&#42;</a>&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t"><span class="elsevierStyleBold">M&#233;dia de &#225;rea de IHQ</span></td></tr><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="\n
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                  \t\t\t\t">1&#44;7&#37;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t">4&#44;4&#37;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#tblfn0005">&#42;</a>&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">&#62; 0&#44;05&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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ISSN: 26662752
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2024 October 108 96 204
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